《刺客教條 2》的故事為一部充滿背叛、復仇和陰謀的史詩般龐大家族鬥爭。故事發生在 1486 年的文藝復興時代，為了反抗掌控威尼斯運河與佛羅倫斯當地龐大的家族勢力，遊戲的主角──義大利佛羅倫斯的貴族 Ezio Auditore de Firenze，一步步地踏上成為刺客大師的道路。
在《刺客教條 2》的開放世界中，玩家將可以自由決定執行任務的方式，除了步行和游泳之外，甚至還能以「飛行」的方式移動；除此之外，遊戲也將會有更多的武器，甚至學習到卸除敵人武裝、並反過來以此武器對敵的技巧。
《刺客教條 2》尚未公布發行平台，預定 2009 年底推出。
