以下為 Ubisoft 公開的《刺客教條 2》角色與黨派設定內容：
‧Desmond Miles
年齡︰25
體重︰170 磅
身高︰6 呎
血型︰A+
國藉︰美國
人物心理︰獨立，個性內向及自我保護的個性，導致他難以相信別人。Desmond 的父母對他過份保護，只讓他於他們建立的溫室內成長，並認為這是最好的安排。Desmond 過去 9 年刻意逃離大城市，並以玩世不恭的形象，去隱藏個人情感。
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| Desmond Miles |
‧Ezio Auditore
年齡︰17
體重︰165 磅
身高︰6 呎
國藉︰義大利
年份︰1476
人物背景︰雖然 Ezio 的父親 Giovanni 是佛羅倫斯內享負盛名的銀行家，同時擔任 Lorenzo de’ Medici 的政治顧問。但有關 Ezio 的資料並不多，唯一確定的是他曾經拜佛羅倫斯著名銀行家Giovanni Tornabuoni 為師。
人物心理︰具魅力，好勝，具異性緣及富冒險精神。
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| Ezio Auditore |
◆ 黨派介紹
‧傭兵
黨派頭目：Mario- Ezio 的叔叔。
在遊戲初期，Mario 會教導 Ezio 基本作戰技能，訓練他成為一流刺客。
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| Mario | 傭兵部下 |
‧盜賊
黨派頭目︰Antonio。
盜賊藏身於威尼斯商業區內，他們像俠盜羅賓漢，專門向生活奢華的貴族下手。但在搶劫時，並不會傷害被搶劫目標。
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| Antonio | 盜賊部下 |
‧娼妓
黨派頭目︰Paola
Paola 根據地在佛羅倫斯妓院，她們會色誘守衛，分散守衛的注意力，協助 Ezio 潛過而不被發現。
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| Paola | 娼妓部下 |
◆ 敵人介紹
‧守衛：守衛分為3個等級，包括民兵(Militia)，菁英 (Elite)，領袖(Leaders)。
守衛每升一級會有新的裝備，包括武器及護甲。
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| 守衛 |
‧搜兵(Seekers)：對任何可疑的動作都很敏感。
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| 搜兵 |
‧迅兵(Agiles)：攜帶小型武器，但擁有快速的移動速度 。
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| 迅兵 |
‧蠻兵(Brutes)：動作緩慢，其攻擊力全仰賴「蠻力」。
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| 蠻兵 |
‧弓箭手(Archers)：弓箭手維持地區治安，當對方進入有關地區而不肯離開，他們便會作出攻擊。
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| 弓箭手 |
PS3/Xbox 360《刺客教條 2》預定 11 月 17 日、20 日在北美、歐洲問世，PC 版規畫於 2010 年第一季推出。
