本遊戲雖然是從 N64 版改編，但不同於 N64 版中玩家只能操作瑪利歐 1 人的設定，NDS 版中將有瑪利歐、路易奇、壞俐歐與耀西等 4 名角色可供玩家選擇，每位角色都有各自的特殊能力。除了角色的增加之外，遊戲的內容也大幅的增加，新增了許多關卡，威力星的數目也比 N64 版多出了 30 顆。
遊戲並利用 NDS 的無線網路功能來提供各種多人遊玩模式，包括多人同樂的冒險模式，以及各式各樣利用觸控螢幕對戰遊玩的小遊戲，而且多人模式只需要一個遊戲卡匣就可以透過無線網路分享的方式，提供多名 NDS 玩家一同遊玩，非常划算。
《超級瑪利歐 64 DS》預定 11 月 21 日於美國，12 月 2 日於日本隨 NDS 主機一同上市，定價 29.99 美元 / 4800 日圓（含稅），台灣地區也預定由博優公司代理，與日本同步推出。
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