另外，鮮明的角色設定也是《質量效應 2》的賣點之一，這次除了主角薛普（Shepard）之外，還將出現多位不同特性與技能的夥伴，與玩家一同探索龐大的銀河系展開冒險，玩家也可透過對話及故事的進行，與夥伴有深入而精彩的互動。
◆ 幻影人（ILLUSIVE MAN）
神秘且強大的幻影人，掌控著 Cerberus 這個專門保護人類在銀河利益的神秘組織。他是「為達目的，不擇手段」的忠實信徒。沒有什麼比確保人類在銀河的生存權和支配權更為重要。為了應付新「收集者」（Collector）帶來的威脅，幻影人雇用了指揮官薛普，並賦予他各式工具，組織一支隊伍來拯救人類。在他看似利他主義的行動背後，是否隱藏著什麼真相？更重要的，薛普是否能夠信任幻影人？
◆ 米蘭妲（MIRANDA LAWSON）
出生在地球的米蘭妲，是含著金湯匙長大的。然而，在她富裕出生的背景之下，卻造就了一位冷靜沈著、充滿幹勁、不計代價完成任務的奇女子。她對任務及目標，有著超人一等的判斷及衡量本事。米蘭妲不但是厲害的生物專家，也是出色的科技專家。
她得天獨厚的天賦組合，讓她能輕鬆突破敵人的力場，並接著給予致命的生物攻擊。她年輕時就與 Cerberus 所有接觸，現在，幻影人和她將全副心力投注在他們的目標上。為了達成 Cerberus 的目標，她願竭盡一切所能。
◆ 榭恩（THANE KRIOS）
身為武僧的榭恩是 Drell 族的致命殺手。他奉行禁慾主義，性情鎮定且非常具有靈性。他對自己踏上的宗教之路堅信不移，而他所信奉的宗教有許多的儀式與祈禱。對榭恩來說，他的身體是為他雇主所用的武器，然而，他不會毫無理由地隨意殺戮。有一次，出現了一位出價極高的雇主，但卻發生了一件事情，一件永遠改變他的事情……。
現在，他改變了他的專業哲學；他不再接受付費合約，而寧可憑著自己的道德良知和宗教信仰來選擇他的目標。任何武器拿在榭恩手中都十分致命，而他同時也具備以意志操控敵人的強大生物能力。如果指揮官薛普可以說服榭恩加入他的任務，他的身邊將有一位全銀河最危險的殺手。
◆ SUBJECT ZERO
每殺一人，她就在身上烙上一枚刺青，因此她全身佈滿了墨水痕跡。Subject Zero 曾四處打滾：混過幫派、參入教派，且仍舊保有當時的髮型。她是擁有謎樣過去的強大生物戰士，我們對 Subject Zero 的所知，僅侷限於她深深為兇殘與暴力所吸引。她極端不穩定的情緒，不能作為她運用生物能力把敵人像垃圾搬地舉起並丟棄毫的開脫藉口。她十分危險、不穩定且極度暴力，而這正好可以滿足執行自殺任務的指揮官薛普的需求。Subject Zero 的技能和能力，對薛普的隊伍來說是相當珍貴的資產，前提是，他得能夠駕馭住她。
◆ 塔莉（TALI'ZORAH）
Quarian 傭兵塔莉回來了。在 Geth 襲擊Citadel之後，Tali 回到了移民艦隊並成為了 Neema 的船員。以科技和工程能力著稱的她，是 Quarian 艦隊中受到敬重且十分重要的一員。塔莉獨特的洞察力，使她能夠駭入機械化對手、使護盾過載，或佈署自動戰鬥機械人。她的聰明才智以及科技技能，不但曾幫助指揮官薛普對付了 Geth，更將在面對新敵人時發揮更大的功效。
◆ 薩瑪菈（SAMARA）
Asari 族的薩瑪菈是一名 Justicar。她不但放棄了生育，更拋棄了除武器和護甲外的所有世俗財產，立志遊走於銀河之間糾正一切的錯誤（以他們不可動搖的律法為基礎）。薩瑪菈是威力強大的生物戰士，進行任務時不但精打細算且堅毅不撓。她不避諱殺生，但得在 Asari 律法的規範之下，她反對「不正當」的暴力手段。
在她泰然自若的皇室舉止下，隱藏著不為人知的秘密，那是一段令她感到內疚的陳年往事。薩瑪菈究竟有著什麼樣的不堪過去，為何讓迫使她做出如此激烈的決定？
◆ 哥藍特（GRUNT）
哥藍特相信一切都可透過打鬥來解決，他是年輕的 Krogan 族人，容易激動且精力旺盛。他與生俱來的 Krogan 本能，驅使他行為暴力且愛好殺戮，但也並非不加選擇。在他所謂的「力量帶來權利」哲學下，哥藍特從不避諱地質疑指揮官薛普為何不採取同樣的手段。和他的 Krogan 族人一般，他是為了榮耀戰鬥而活，而且不知戰敗為何物。
哥藍特年輕氣盛，自以為所向無敵，但卻擁有超齡的狡詐。他之所以加入薛普的隊伍，是因為他相信這可以幫助他打一場屬於他自己的戰鬥。
PC/Xbox 360 《質量效應 2》預定 2010 年 1 月 26 日上市。
